兔溶菌酶检测试剂盒实验操作小窍门

　　兔溶菌酶检测试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛孕酮(P)水平。用纯化的牛孕酮(P)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入孕酮(P)，再与HRP标记的孕酮(P)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的孕酮(P)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛孕酮(P)浓度。

　　兔溶菌酶检测试剂盒实验操作小窍门：

　　1、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

　　2、合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

　　3、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

　　4、要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。

　　5、样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。

　　6、为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

　　7、未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。

　　8、ELISA试剂盒实验中，加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

　　9、剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5、0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

　　10、人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。

　　11、每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

　　12、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

　　13、对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

　　14、没有去离子水或双蒸水时，可以使用娃哈哈纯净水配制溶液，切勿使用自来水。

　　15、在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。

　　16、吸取液体时速度不易太快，以免产生气泡，人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。

　　17、吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸，减少误差。