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兔溶菌酶检测试剂盒实验操作小窍门

发布时间: 2022-10-22  点击次数: 167次
  兔溶菌酶检测试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛孕酮(P)水平。用纯化的牛孕酮(P)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入孕酮(P),再与HRP标记的孕酮(P)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的孕酮(P)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛孕酮(P)浓度。
  兔溶菌酶检测试剂盒实验操作小窍门:
  1、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
  2、合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
  3、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
  4、要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
  5、样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
  6、为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
  7、未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
  8、ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
  9、剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5、0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
  10、人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
  11、每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
  12、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
  13、对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
  14、没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
  15、在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
  16、吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。
  17、吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
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