前动力蛋白2(PK2)酶联免疫吸附测定试剂盒

前动力蛋白2(PK2)酶联免疫吸附测定试剂盒

酶联免疫吸附测定法

1971年瑞典学者Engvall和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成为分析化学领域中的前沿课题 ，它是一种特殊的试剂分析方法，是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。

中文名

酶联免疫吸附测定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

别名

ELISA法

发现者

Van Weerman

原理

抗体与酶复合物结合显色

前动力蛋白2(PK2)酶联免疫吸附测定试剂盒

试剂
（1）　包被缓冲液（PH9.60.05M碳酸盐缓冲液）:
Na2CO3 1.59克
NaHCO3　 2.93克
加蒸馏水至1000ml
（2）　洗涤缓冲液（PH7.4PBS）：0.15M
KH2PO4 　0.2克
Na2HPO4·12H2O　2.9克
NaCl　8.0克
KCl　0.2克
Tween-20　0.05%　0.5ml
加蒸馏水至1000ml
（3）　稀释液：
牛血清白蛋白（BSA） 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。
（4）　终止液（3M　H2SO4）：
蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸（98%）21.7ml。
（5）　底物缓冲液（PH5.0磷酸枣柠檬酸）:
0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml
0.1M柠檬酸（19.2克/L）　 24.3ml
加蒸馏水50ml。
（6）　TMB（四甲基联苯胺）使用液:
TMB（10mg/5ml无水乙醇）0.5ml
底物缓冲液（PH5.5）　 10ml
0.75%H2O2　 　32μl
（7）　ABTS使用液:
ABTS　0.5mg
底物缓冲液（PH5.5）　 1ml
3%H2O2　 　2μl
（8）　抗原、抗体和酶标记抗体。
（9）　正常人血清和阳性对照血清。
器材
（1）　聚苯乙烯塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。
（2）　小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
（3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。