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大鼠胃泌素(Gas)酶联免疫吸附测定试剂盒

大鼠胃泌素(Gas)酶联免疫吸附测定试剂盒

简要描述:产品名称:大鼠胃泌素(Gas)酶联免疫吸附测定试剂盒
成分:酶标板、试剂、标准品等
规格:48T/96T
保存条件:2~8℃,温度6摄氏度,有效期6个月
服务:免费代测
精准度:高

产品型号: LB-406222

所属分类:其它ELISA试剂盒

更新时间:2022-04-27

厂商性质:生产厂家

详情介绍


大鼠胃泌素(Gas)酶联免疫吸附测定试剂盒

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作要点等方面对其进行了详细介绍。

中文名

酶联免疫吸附剂测定

外文名

enzyme linked immunosorbent assay

简写

ELISA或ELASA

类型

概念

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠组织激肽释放酶(KLK)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠组织激肽释放酶(KLK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度


大鼠胃泌素(Gas)酶联免疫吸附测定试剂盒


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    包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

      酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

      酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。


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