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犬白细胞介素13(IL-13)吸附测定试剂盒

犬白细胞介素13(IL-13)吸附测定试剂盒

简要描述:产品名称:犬白细胞介素13(IL-13)吸附测定试剂盒
成分:酶标板、试剂、标准品等
规格:48T/96T
保存条件:2~8℃,温度6摄氏度,有效期6个月
服务:免费代测
精准度:高

产品型号: LB-4062813

所属分类:其它ELISA试剂盒

更新时间:2022-05-01

厂商性质:生产厂家

详情介绍

犬白细胞介素13(IL-13)吸附测定试剂盒

)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。


犬白细胞介素13(IL-13)吸附测定试剂盒

用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;

2.次日洗涤3次;

3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;

4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;

5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;

6.’最后一遍用DDW洗涤。

其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6

双抗体夹心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+"、“-"号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性


做好对照

正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。


一、ELISA实验通用规则

1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。

2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。

3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

4、实验时,要使底物避光保存。

5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。

8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

12、底物是光敏感的,要在临用前现配。

13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。

14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。

15、待检样品要澄清,否则会影响结果。

16、温浴时间应遵守试剂盒规定。

17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。

18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证






































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