鸡碳酸酐酶(CA)检测试剂盒 |
规格:96T/48T
产品用途:科研 实验
公司服务:ELISA试剂盒 免费代测
鸡碳酸酐酶(CA)检测试剂盒 |
鸡碳酸酐酶(CA)试验原理:
鸡碳酸酐酶(CA)试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
鸡碳酸酐酶(CA)试剂盒试剂盒内容及其配制
血清:使用血清分离管(SST)和全血标本在室温下两小时或4℃过夜℃,然后离心15分钟,在1000×g下。删除上清即可检测,或分装和店内样品在-20°C或-80°C。但应避免反复冻融循环。
等离子:采集血浆中EDTA或肝素作为抗凝血剂。在2-8°C在30分钟内收集离心15分钟,1000×G。即可检测,或分装保存样本在-20°C或-80°C。但应避免反复冻融循环。
检测程序:
在使用前,将所有试剂和样品室温。再次离心样品解冻后测定前。据建议,所有样品和标准来测定一式两份。
1。准备好所有试剂,工作标准和样品在前面的章节中。
2。请确定井数的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥剂,密封保鲜袋,将未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时,在37℃下一盘布局记录标准和样品检测。
4。每孔中取出的液体,不洗。
5。向每孔中加入100μl生物素抗体(1倍)。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时,在37℃下(生物素抗体(1X)可能会出现混浊。预热至室温,轻轻混匀,直到出现均匀解决方案。)
6。吸液的各孔和洗涤,共洗涤三次重复该过程两次。洗净,每孔填充洗涤缓冲液(200μL)使用喷瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,静置2分钟,*清除液体的每一步是良好的性能。最后一次洗涤后,清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一个新的粘接剂条。温育1小时,在37℃下
8。重复的愿望/洗涤过程中,在步骤6的5倍。
9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟,在37℃下避光
10。一站式解决方案,每孔加入底物,轻轻晃动酶标板,以确保充分混合。
11。在5分钟内,设置至450nm,使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正,设置为540nm或570nm处。在540nm或570nm波长在450nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450nm处未经修正读数直接,可能会比较高,不太准确.
鸡碳酸酐酶(CA)试剂盒局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
鸡碳酸酐酶(CA)试剂盒试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。